“食品安全快檢儀器”是一種快速檢測(cè)食品安全的方式,可短時(shí)間內(nèi)對(duì)可疑食品進(jìn)行初級(jí)篩查和對(duì)現(xiàn)場(chǎng)食品安全狀況進(jìn)行初步評(píng)判,提升監(jiān)督成效,預(yù)防食品安全事故發(fā)生。
目前,市場(chǎng)上的快檢技術(shù)主要包括酶聯(lián)免疫技術(shù)、免疫膠體金試紙技術(shù)、化學(xué)比色分析技術(shù)、生物芯片技術(shù)、熒光定量PCR技術(shù)、分子生物學(xué)技術(shù)等,其中前三種技術(shù)是目前市場(chǎng)上應(yīng)用比較成熟的現(xiàn)場(chǎng)快檢方法。
01酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)
1971年Engvall和Perlmann發(fā)表了酶聯(lián)免疫吸附劑測(cè)定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)用于IgG定量測(cè)定的文章,使得1966年開始用于抗原定位的酶標(biāo)抗體技術(shù)發(fā)展成液體標(biāo)本中微量物質(zhì)的測(cè)定方法。
基本原理:
這一方法的基本原理是:
?、偈箍乖蚩贵w結(jié)合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性。
?、谑箍乖蚩贵w與某種酶連接成酶標(biāo)抗原或抗體,這種酶標(biāo)抗原或抗體既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí),把受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的抗體或抗原)和酶標(biāo)抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與其他物質(zhì)分開,最后結(jié)合在固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量成一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)顏色反應(yīng)的深淺刊物定性或定量分析。由于酶的催化頻率很高,故可極大地地放大反應(yīng)效果,從而使測(cè)定方法達(dá)到很高的敏感度。
ELISA可用于測(cè)定抗原,也可用于測(cè)定抗體。在這種測(cè)定方法中有3種必要的試劑:
①固相的抗原或抗體
?、诿笜?biāo)記的抗原或抗體
?、勖缸饔玫牡孜铩?br />
根據(jù)試劑的來(lái)源和標(biāo)本的性狀以及檢測(cè)的具備條件,可設(shè)計(jì)出各種不同類型的檢測(cè)方法。
02免疫膠體金試紙技術(shù)
膠體金是氯金酸在還原劑作用下,可聚合成一定大小的金顆粒,形成帶負(fù)電的疏水膠溶液。由于靜電作用而成為穩(wěn)定的膠體狀態(tài)。
免疫金標(biāo)記技術(shù)原理:
膠體金顆粒表面負(fù)電荷與蛋白質(zhì)的正電荷基團(tuán)因靜電吸附而形成牢固結(jié)合。膠體金對(duì)蛋白質(zhì)有很強(qiáng)的吸附功能,蛋白質(zhì)等高分子被吸附到膠體金顆粒表面,無(wú)共價(jià)鍵形成,標(biāo)記后大分子物質(zhì)活性不發(fā)生改變。金顆粒具有高電子密度的特性。金標(biāo)蛋白在相應(yīng)的配體處大量聚集時(shí),在顯微鏡下可見黑褐色顆?;蛉庋劭梢娂t色或粉紅色斑點(diǎn)。
03化學(xué)比色技術(shù)
化學(xué)比色技術(shù)是食品安全快速檢測(cè)中經(jīng)常使用的技術(shù),化學(xué)比色法采用檢測(cè)試劑和檢測(cè)試紙兩種方法,他們都是利用迅速產(chǎn)生可見顏色變化的化學(xué)反應(yīng)來(lái)檢測(cè)待測(cè)物質(zhì),可借助肉眼比色、可見光分光光度計(jì)、比色卡等實(shí)現(xiàn)定性或定量。隨著化學(xué)比色技術(shù)的不斷發(fā)展,與其配套的微型檢測(cè)儀器也相應(yīng)出現(xiàn),并日趨發(fā)展成熟,與國(guó)外不相上下?;瘜W(xué)比色法簡(jiǎn)單快速,結(jié)果直觀,廣泛應(yīng)用于食品常量物質(zhì)、食品添加劑、農(nóng)獸藥殘留、重金屬、有機(jī)物污染等方面的快速檢測(cè)。但該方法也有一些缺點(diǎn),比如對(duì)化學(xué)反應(yīng)自身?xiàng)l件依賴性較強(qiáng),檢測(cè)過(guò)程中受到的干擾因素也比較多。
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